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交联琼脂糖凝胶CL-2B


相关信息

有效期 5年
英文名称 Sepharose CL-2B
储存条件 2-8℃
单位
规格 100ml 500ml

琼脂糖凝胶 CL-2B是在琼脂糖凝胶 2B的基础上通过交联使微球的刚性增强,理化性能提高,有利用于工业生产。该介质用于生物大分子的凝胶层析。

1 外观

本品为白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

2 理化指标

2%琼脂糖凝胶

排阻极限

70000~40×106 (球蛋白)

形状

球形

粒径

60~200μm

最高流速

15 cm/h*

耐压

0.025 MPa

pH值稳定性

3~13(长时间)2~14(短时间,在位清洗)

化学稳定性

可耐8mol/L尿素、6mol/L盐酸胍;可耐有机溶剂,如乙醇、DMFTHFDMSCH3Cl、丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈

*检测条件: 层析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃,流动相为0.1mol/LNaCl。

3 包装

产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小、应用范围”等内容。

4 贮存

产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。

用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。

5 注意事项

本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中

6 运输

运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。

7 保质期

5年。

8 应用

本产品具有很高的化学稳定性、高流速、较好的机械性能、可多次重复使用等特点,非特异性吸附低,回收率高,可用有机溶剂及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,适用于工业规模生产,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的凝胶色谱纯化。

下面简要介绍介质的使用过程。

8.1 装柱

凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高,为了保证分离效果,一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶,或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。


以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子,可在柱床稳定后将柱床压紧,接好管路。

(1)让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。

(2)选择一根一定直径的柱子,长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。

(3)将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。

(4)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。

(5)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过,使柱床稳定。用缓冲液平衡柱子,到柱床稳定。

(6)最好用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平,上好柱头。

8.2 平衡

让缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。

8.3 上样

(1)样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。

(2)介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。

(3)上样体积约为柱体积的1~2%,越小分离越好。

8.4洗脱

用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。

8.5再生

一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。

8.6 注意

在装柱、使用和保存柱子的时候,始终要避免柱子流干气泡进入。

若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。

8.7 在位清洗

(1)对于以离子键结合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。

(2)对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类,可用1M NaOH 去除。

(3)对强疏水性结合的蛋白、脂类等,用4~10倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗,但要注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加,否则容易产生气泡。

清洗完毕后,用至少3倍缓冲液平衡柱子。

8.8 注意

在装柱、使用和保存柱子的时候,要避免柱子流干气泡进入。

8.9 去热源

用0.5M的氢氧化钠清洗柱子5~6小时或用0.1M的氢氧化钠24小时。或用以下方法步骤去除:

(1)2倍柱体积的70%乙醇;

(2)2倍柱体积50mM Tris-Hcl pH7.5;

(3)1倍柱体积4M尿素;

(4)3倍柱体积的Tris缓冲液+0.1M Nacl;

以上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。

8.10 消毒

用0.5~1M NaOH室温下洗8~10倍柱体积,初始缓冲液平衡柱子。

特别注意:

上样之前,样品必须去除色素,否则色素会被吸附到填料上,影响填料的正常使用。


  备注:产品信息可能会有优化升级。请以实际标签信息为准。






注意:
1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

货号:S8731
品牌:Solarbio
规格:

为科研服务、为生命尽责

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